经过我们多年生（shēng）产实践（jiàn）栽（zāi）培总结出来的经验（yàn）是选用当年表（biǎo）现优异的羊肚（dù）菌子实体进行组织分离（lí）以后，再繁育出来的（de）菌种（zhǒng）进行栽培播种，由于（yú）转（zhuǎn）代次数少，变异性概率（lǜ）低。再进行播种，基本可以保障稳（wěn）定的出菇率（lǜ）。综（zōng）上所述，掌握成（chéng）熟的羊肚菌育种技（jì）术是必（bì）要的。以下为（wéi）大家详（xiáng）细的介（jiè）绍羊肚（dù）菌菌种分离及提纯复壮技术：
一，选（xuǎn）种菇  正（zhèng）常情况在清晨还（hái）没有浇（jiāo）水之前（qián）采摘6分熟（shú）的，没有（yǒu）病害感染，虫害（hài）咬食的健康羊肚菌作为种菇，还要看菇形（xíng）与其母本的外观形态相（xiàng）似度越高越好（hǎo）。采菇以后不要（yào）带土装入塑料袋中（zhōng），根据不同品种写（xiě）好（hǎo）标签。
二（èr），种菇（gū）处理  将采到的种菇进行测量，称重，并（bìng）做好详细记录，测（cè）试种菇高，菌柄直（zhí）径，菌（jun1）帽直径，和菌帽高度。

三，准（zhǔn）备工（gōng）作  将制备好的（de）PDA 培养基（jī）试管，无菌水，储水罐（guàn），酒（jiǔ）精（jīng）棉，无（wú）菌（jun1）棉摄子，酒精灯，火机（jī），种菇等物（wù）品放到（dào）无菌操（cāo）作台上（shàng），将杀菌灯开好，无菌风机同时（shí）打开，20分钟后就可以进行分离羊肚（dù）菌菌种的操作了（le）。也可以在（zài）接种箱中进行（háng），把上述物品全部放入接种箱。接种（zhǒng）箱（xiāng）封闭（bì）好以后（hòu）用二氯异氰悄酸纳薰蒸30分钟即可开始分离（lí）羊肚菌（jun1）菌种的工作了。

四，分离菌种  1，带好手套，伸入（rù）无菌操作台的无菌区，或接（jiē）种箱内，先用酒精棉（mián）球（qiú）对（duì）双（shuāng）手手套外（wài）表进行彻底擦拭消毒，然后用无菌水对羊肚菌（jun1）种（zhǒng）菇进行（háng）冲洗冲洗过程的水倒入储（chǔ）水罐中，内外都要冲（chōng）洗，冲洗时间为（wéi）2-3分钟（zhōng），冲洗以后用无菌棉吸干羊（yáng）肚菌表面水分。然后将（jiāng）攝子用酒精棉消毒处（chù）理以后，放在酒精灯（dēng）火焰顺风方向（xiàng）燃烧消毒（dú），再（zài）将羊肚菌菌帽（mào）与菌柄处（chù）掰（bāi）断（duàn），将菇（gū）帽部分放到一（yī）边，只用菌柄部分，再拿起一支（zhī）试管（试管和菌柄同（tóng）时（shí）用左手拿好，在酒精灯（dēng）火焰顺（shùn）风处（chù）取下棉（mián）塞，棉塞夹在右（yòu）手（shǒu）中指（zhǐ）和无名指之间，注意塞（sāi）入试管部分的棉塞向外，不要与（yǔ）手（shǒu）接触，右手的拇指和食指（zhǐ）拿摄（shè）子夹取菌柄与（yǔ）菌帽断（duàn）开处（chù）的3毫（háo）米（mǐ）见方的一块羊肚菌（jun1）组织，接入试管斜面培养基前端，塞好棉（mián）塞（sāi），放在旁边，注意始终保持试管培（péi）养基（jī）平（píng）面向下，轻拿轻（qīng）放。然（rán）后再进行下一支试管的操（cāo）作（zuò）。

五，培养  将分离好的（de）菌（jun1）种贴好标签：标签内容包括（kuò）日期，品种（zhǒng）名称等（děng）信（xìn）息（xī）。然后就可以放在20-23度的条件（jiàn）下（xià）恒温培养。注意每天观察长势，杂菌感染（rǎn）严重的及时挑出（chū）。感染轻微的可以保留（liú）进行提纯处理。

六，提纯  在分（fèn）离的过程中，难免（miǎn）有杂菌感染（rǎn），根（gēn）据羊肚菌菌丝生长（zhǎng）速度快（kuài）的特点，即使有羊肚菌（jun1）菌丝（sī）与杂菌共（gòng）同（tóng）萌（méng）发生长，经过三天培养，羊肚菌菌丝长势会超过杂菌（jun1）一大截，遇到这（zhè）种情况时就（jiù）可（kě）以进行（háng）提纯处理：
1，准备工作：准备提纯的菌种，空PDA试管培养基（jī），酒精灯，酒精棉，接种钩，火机。消毒处理和上述（shù）方法一致。
2，提纯流程  戴（dài）好手套，用酒精棉擦拭消（xiāo）毒，将接种钩（gōu）擦（cā）拭消毒，然后在酒精灯火焰顺风（fēng）方向取下等待提纯菌种试（shì）管棉塞（sāi），用接种钩在酒精灯火焰处灼烧消（xiāo）毒处理以后将（jiāng）原（yuán）来接入的已经感染杂（zá）菌的组（zǔ）织块部位的（de）培养基一同（tóng）钩出试（shì）管，没有感染杂（zá）菌（jun1）长有（yǒu）羊（yáng）肚菌菌丝的（de）培养基保留1-2厘米即可。注意接种钩尽量不（bú）要（yào）接（jiē）触到（dào）杂菌感染的部分。然后仔（zǎi）细对接种钩进行（háng）彻底消毒处理以（yǐ）后就可以取保（bǎo）留的羊肚菌纯菌丝接入新的PDA培养基中，大小以3毫米见（jiàn）方（fāng）一块为宜。然（rán）后（hòu）将提纯后的试管（guǎn）贴好标签（qiān），做（zuò）好（hǎo）记录。再放到20-23度进行恒温培养。
七，菌种保藏   分离（lí），提纯好的羊肚菌菌种（zhǒng）以（yǐ）后需要及时进行菌种保藏处理，具体请参照菌（jun1）种保藏方法 在适当的（de）季节（jiē）进行出（chū）菇栽培（péi）实（shí）验。